DÉPARTEMENT DE GÉNIE CHIMIQUE
BCM 20329: INTRODUCTION AU GÉNIE BIOCHIMIQUE
1D - PROTÉINES ET ENZYMES
Structures primaire
à quaternaire des protéines
Structure primaire: séquence des acides aminés
Par exemple, une partie de la séquence de l'hexokinase de la levure S. cerevisiae:
Structure secondaire: patron répétitif
L'hélice alpha (pont H tous les 4 a.a., a.a. hydrophobes):
Le feuillet beta:
Structure tertiaire: forme 3-D
Par exemple, l'hexokinase mentionnée précédemment:
Structure quaternaire: assemblage de sous-unités
Par exemple, l'hemoglobine est composée de 4 polypeptides, dont 2 sous-unités alpha et 2 sous-unités beta:
Aussi: la modification post-traductionnelle
Pour en
savoir plus sur les modifications post-traductionnelles, cliquez
ici (Cours BIOSCI99A, Harmut Luecke, University of California, Irvine)
Différents
rôles des protéines
LES
ENZYMES
Une enzyme agit comme un catalyseur afin d'accélérer la transformation d'un substrat en produit.
Si une bactérie thermophile (vivant à température
moyenne) et une psychrophile (vivant à température très froide) ont chacune une
enzyme qui agissent sur la même réaction, laquelle des 2 abaisserait le plus
l'énergie d'activation?
Différents types d'enzymes (suffixe -ase)
Caractéristiques des enzymes
spécificité (mécanisme clé-serrure)
grande taille par rapport au substrat
rapidité
déformabilité
(EcoR1 autour de l'ADN)
Mode d'action: interaction avec le site actif = site spécifique de la réaction
E + S <===> E.S ====> E + P
Pourquoi n'y aurait-il-pas plusieurs
sites spécifiques sur une même enzyme?
À proximité du site actif: les co-facteurs (composant
non-protéique, essentiel à l'activité enzymatique)
à liaison forte: groupes prosthétiques.
En général des cations métalliques. ex: les atomes de Fe dans l'hémoglobine,
les métallo-protéases.
à liaison faible:
contribuent à la réaction. Ex: vitamines, transporteurs d'éléctrons (NAD+,
FAD), transporteurs d'énergie (AMP, ADP, ATP, GTP, etc)
apoenzyme
+ co-facteur = holoenzyme
Autre
site spécifique: site allostérique
molécule qui s'y
attachera: effecteur allostérique,
qui aura un effet allostérique sur
l'enzyme en modifiant la forme de la protéine et spécialement du site
actif. Peut avoir un effet positif ou négatif (inhibition).
Inhibition enzymatique
Thermique: > 60C, dénaturation de la plupart des
protéines
Chimique: irréversible(empoisonnement)
ou réversible(joue alors souvent un rôle
de régulation)
Inhibition compétitive: l'inhibiteur
se lie au site actif, c'est un analogue du
substrat.
irréversible, ex:
certains agents thérapeutiques
réversible:
Inhibition non-compétitive
non-spécifique et
irréversible: destruction totale (par métaux lourds: Pb, Hg, Cd, Ni, ou
cyanure, CO, etc)
spécifique et réversible:
Autres modes de régulation:
les protéases
la concentration en enzymes (régulation de
l'expression)
Étude des
protéines et des enzymes
Étapes:
EXEMPLES
La trypsine de rat
- Informations sur EXPASY (www.expasy.org) avec les mots-clés "rat trypsin anionic"
- Description dans la section "comments"
- Activité catalytique: coupe Arg-X et Lys-X (R et K)
- Caractéristiques
- Séquence
- Forme 3D (trypsine, trypsine.zip)
L'albumine humaine
- Informations sur EXPASY avec les mots clés "albumin human"
- No d'accession(P02768)
- Fonction
- Gel 2D
- Caractéristiques: structures secondaires, groupes prosthétiques ou cofacteurs, glycosylation (N- linked, glucides liés à l'asparagine, ou O- linked, liés à la sérine, la thréonine ou la cystéine), phosphorylation (sur la sérine, la thréonine ou moins fréquemment la tyrosine) etc.
- Séquence
- PM et PI (utilisation de l'outil "protparam")
- Peptides générés suite à une digestion (utilisation des outils de protéomiques "peptide cutter" et "peptide mass" dans EXPASY (http://ca.expasy.org/tools/)
- Forme 3-D (albumine, albumine.zip)
Copyright
© A. Garnier, 2001 Ce matériel peut être utilisé à des fins pédagogiques
uniquement. Aucun droits de reproduction à des fins commerciales.